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快三走势_花少钱中大奖22270.COM-_固相微萃取 气相色谱 质谱测定植物叶片中的挥发性物质

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内容提示: !""# 年 $ 月!"#$ !""#色谱!"#$%&% ’()*$+, (- !"*(.+/(0*+1"2%&#’ !% (&’ %&%& ’ &%#收稿日期: !""()"))*+通讯联系人: 王明林, 男, 博士, 副教授, *+#:基金项目: 山东省教育厅资助项目 (!++*(&) ’("(&)) )!%+!%*, ,)-./#: -#0.12, 34."’ +4"’ 51’固相微萃取!气相色谱" 质谱测定植物叶片中的挥发性物质王明林*, - 乔鲁芹!, - 张- 莉&, - 吴烈钧&, - 田洪孝&(*’ 山东农业大学食品学院,山东 泰安 !$*"*);!’ 中国林业科学研究院 森林生态环境与保护研究所,北京 *"""+*;&’ 山东省化工研究院,山东 济南 !(""*%)摘要: 采用快三走势_花少钱中大奖22270.COM-_固相微萃取 (678,) 方法吸附植物叶片中的挥发性物质, ...

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!""# 年 $ 月!"#$ !""#色谱!"#$%&% ’()*$+, (- !"*(.+/(0*+1"2%&#’ !% (&’ %&%& ’ &%#收稿日期: !""()"))*+通讯联系人: 王明林, 男, 博士, 副教授, *+#:基金项目: 山东省教育厅资助项目 (!++*(&) ’("(&)) )!%+!%*, ,)-./#: -#0.12, 34."’ +4"’ 51’固相微萃取!气相色谱" 质谱测定植物叶片中的挥发性物质王明林*, - 乔鲁芹!, - 张- 莉&, - 吴烈钧&, - 田洪孝&(*’ 山东农业大学食品学院,山东 泰安 !$*"*);!’ 中国林业科学研究院 森林生态环境与保护研究所,北京 *"""+*;&’ 山东省化工研究院,山东 济南 !(""*%)摘要: 采用快三走势_花少钱中大奖22270.COM-_固相微萃取 (678,) 方法吸附植物叶片中的挥发性物质, 然后采用气相色谱 9 质谱法 (:;9 86) 分析了挥发性物质的成分。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-在 %( < 水浴温度下, 采用 7&#$.5=$#.>+ ()( !-) 固相微萃取头, 在广口瓶中植物叶片的上方顶空吸附 #" -/1, 然后进行 :;9 86 分析。结果表明, 植物叶片中的挥发性物质得到了很好的分离, 受山楂叶螨 (!"#$%&’()*+ ,-".."-+) 危害严重的植物的完好叶片中的挥发性物质均含有顺)&)己烯)*)醇乙酸酯、 顺)&)己烯)*)醇丁酸酯和 !)法呢烯, 且含量较大。初步确定这些物质是对山楂叶螨具有引诱作用的主要物质, 从而为利用天然生物活性物质防治山楂叶螨提供了理论依据。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-关键词: 固相微萃取; 气相色谱; 质谱; 挥发性物质; 植物叶片中图分类号: ?#()- - 文献标识码: @- - 文章编号: *"""))$*& (!""#) "%)"&%&)"%- - 栏目类别: 研究论文#$%&’()( *+ ,*&%-)&. /*$(-)-0.$-( +1*2 3.%4.( *+ 5&%$-( 6’7%( /81*2%-*91%:8’" ;%(( <:.=-1*2.-1’ >)-8<*&)?!58%(. ;)=1*.@-1%=-)*$A@(: 8/12#/1*,BC@? D"E/1!,FG@(: D/&,AH D/+I"1&,*C@( G&12J/.&&(!/ 0122"3" 14 5116 7(-".(",7)&.61.3 83%-(*2#*%&2 9.-,"%+-#’,!&-&. "#!$!%,0)-.&;"/ :"+"&%() ;.+#-#*#" 1451%"+# <(1213’,<.,-%1.=".# &.6 >%1#"(#-1.,0)-."+" 8(&6"=’ 14 51%"+#,?"-@-.3 !$$$&!,0)-.&;’/ 0)"=-(&2 ;.6*+#%’ :"+"&%() ;.+#-#*#" 14 7)&.61.3 >%1,-.(",A-.&. "($$!),0)-.&)#6(-1%=-:@ -+>K&4 L&= .1.#$M/12 N&#.>/#+ 5&13>/>"+1>3 L=&- O#.1> #+.N+3 0/>K 2.3 5K=&-.>&2=.)OK$9 -.33 3O+5>=&-+>=$(:;9 86)5&"O#+4 0/>K 3&#/4)OK.3+ -/5=&+J>=.5>/&1(678,)0.3 4+)N+#&O+4’ *K+ N&#.>/#+ 5&-O&"143 L=&- >K+ O#.1> #+.N+3 /13/4+ . 3+.#+4 L#.3P -./1>./1+4 .> %( </1 . 0.>+= Q.>K 0+=+ +LL/5/+1>#$ +J>=.5>+4 0/>K 7&#$.5=$#.>+()( !-)678, L/Q+=3 O=/&= >& O+=)L&=- :;9 86 .1.#$3/3’ *K+ :;9 86 .1.#$3/3 /14/5.>+4 >K.> >K+ N&#.>/#+ 5&-O&"143 L=&- >K+O#.1> #+.N+3 0K/5K /3 +.3$ >& Q+ 4.-.2+4 Q$ !"#%&’()*+ ,-".."-+ /15#"4+ =+#.>/N+ #.=2+ .-&"1>3&L (-+)&)K+J+1$# +3>+= .5+>/5 .5/4,(-+)&)K+J+1$# +3>+= Q">.1&/5 .5/4 .14 .#OK.)L.-+3+1+’ *K+3+5&-O&"143 0+=+ O=+#/-/1.=/#$ 5&1L/=-+4 >& Q+ .55&"1>.Q#+ L&= .>>=.5>/12 !"#%&’()*+ ,-".."-+’*K/3 L/14/12 -.$ #+.4 >& /4+1>/L$ Q/&#&2/5.# 3O+5/+3 L&= O=+N+1>/12 .14 >=+.>/12 !"#%&’()*+,-".."-+’A.’ >*1?(:3&#/4)OK.3+ -/5=&+J>=.5>/&1(678,) ;2.3 5K=&-.>&2=.OK$(:;) ;-.33 3O+5>=&)-+>=$ (86) ;N&#.>/#+ 5&13>/>"+1>3;O#.1> #+.N+3- -山楂叶螨 (!"#%&’()*+ ,-".."-+) 又名山楂红蜘蛛, 是仁果类和核果类果树的主要害螨之一该螨在我国分布广泛, 因其发生普遍, 危害严重, 易造成 大 量 损 失, 故 引 起 广 泛 关 注。大 量 研 究 表明本身的挥发性物质对昆虫和螨类的趋性有重要影响, 这些挥发性物质可诱使昆虫和螨类到植物上去[*]。[! . %], 昆虫和螨类在选择寄主植物的过程中, 植物取食、 产卵, 从而危害植物。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-快三走势_花少钱中大奖22270.COM-_固相微萃取 (678,) 是广泛应用于食品、 农药残留、 医药卫生及法医学等领域中的样品预处理方法附植物叶片中的挥发性物质, 然后进行气相色谱 9 质谱 (:;9 86) 分析, 初步确定了对山楂叶螨具有引诱作用的主要物质, 从而为利用天然生物活性物质防治山楂叶螨提供理论依据。[( . $], 本研究利用 678, 吸 色谱第 !" 卷!" 实验部分!!!" 实验材料# # 本实验所用苹果、 山楂、 海棠和桃叶片采自泰山竹林寺果园, 樱花叶片取自山东农业大学校园。取样时, 选择靠近顶梢较嫩的无病虫害的干净叶片。!!#" 实验方法!! #! !" 植物叶片挥发性物质的吸附# # 称取新鲜干净的植物叶片 $%% ", 放入 &%% #$的广口瓶内, 用封口膜封口后, 置于 "& % 的水浴锅内, 将固相微萃取装置 (美国 &’()$*+ 公司产) 的针头穿透封口膜, 插入瓶内叶片上方, 然后小心地推出纤维头, 同时用固定装置固定固相微萃取装置的手柄, 自萃取纤维头推出后开始计时, 待吸附完毕后(吸附 ’% #,-) 立即进行 .*/ 0& 分析。!! #! #" 气相色谱1质谱联用分析条件# # 日本岛津公司产 .*/ 0&12( &%&%3 型气相色谱1质谱联用仪, 45&6 质谱数据库。.* 条件: 7(1$弹性石英毛细管柱 (!& # ( %) !& ## ,) 8) ( %) !&!# (澳大利亚 &.) 公司提供) ; 载气为 9: 气, 柱前压 ’*) ! ;(<, 不分流进样; 汽化室温度 !*% %; 接口温度 !*% %; 程序升温条件如下: &% % 保持 ! #,-,再以 $% % / #,- 升至 !%% %, 保持 & #,-。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-0& 条件: 电子轰击离子源 ()5) , 能量 +% :=; 质量扫描范围 !,) % - *&) % >; 扫描速度$ %%% >/ ?; 扫描间隔 %) &?; 阈值$ %%%。#" 结果与讨论#!!" 固相微萃取头的选择# # 称取新鲜干净的苹果叶片 $%% ", 放入 &%% #$的广口瓶内, 用封口膜封口后, 将不同的固相微萃取针插入广口瓶内苹果叶片上方, 小心推出纤维头, 在"& %水浴温度下平衡 ’% #,-, 然后进行 .*/ 0& 分析, 所分析得到的挥发性物质数目见表 $。表 !" 固相微萃取头所吸附的挥发性物质的数目"#$%& !" ’()$&*+ ,- .,%#/0%&+ #1+,*$&1 $2 3456 -0$&*&(0) @,A:B4>#A:B C@ DCE<F,E: ?>A?F<-G:?(H0&(4C-1AC-8:8)(H0&(7C-8:8)(CEI<GBIE<F:(.& !#)&!$&# # 与其他固相微萃取头相比, 萃取头 (CEI<GBI1E<F: 能更多、 更好地吸附叶片中的挥发性物质, 因此在本研究中采用 (CEI<GBIE<F: 固相微萃取头吸附植物叶片中的挥发性物质。#!#" 吸附时间对响应值的影响# # 在 "& %水浴温度下, 苹果叶片中的挥发性物质被吸附在固相微萃取头中。吸附时间不同, 其吸附量也不同。本实验以顺1*1己烯1$1醇乙酸酯的峰高作参照, 研究吸附时间对响应值的影响 (见图 $) 。图 !" 吸附时间对响应值的影响708!!" 6--&9/ ,- #1+,*:/0,; /0)& ,; /<& *&+:,;+&.#%(& ,- !"#=$=<&>&;=!=,%,#9&/#/&38?CBJF,C- F:#J:B<F>B::"& % !# # 可以看出, 吸附时间在 ’% #,- 时, 苹果叶片中的挥发性物质在固相微萃取头中基本达到平衡, 因此实验选择吸附时间为 ’% #,-。#!$" 水浴温度对响应值的影响# # 植物叶片在不同温度下释放气体的速率是不同的。本研究在不同温度下用 (CEI<GBIE<F: 固相微萃取头吸附苹果叶片中的挥发性物质, 以确定最佳水浴温度, 结果见图 !。图 #" 水浴温度对响应值的影响708!#" 6--&9/ ,- ?#/&* $#/< /&):&*#/(*& ,; /<&*&+:,;+& .#%(& ,- !"#=$=<&>&;=!=,%,#9&/#/&38?CBJF,C- F,#::’% #,-!# # 可以看出, 随着温度的升高, 响应值也在不断增大, 在 "& %时达到最大值, 然后随着温度的升高而下降。这是由于温度升高, 有利于植物叶片中的挥发性物质挥发; 但是当温度达到一定数值后, 水分的挥发影响了固相微萃取头对植物叶片挥发性物质的吸附, 且温度升高后, 一些植物叶片易发生褐变, 这也影响了挥发性物质的成分, 因此本研究选择 "& %作为水浴温度。#!%" 植物叶片挥发性物质的成分分析# # 在 “ $! !” 节分析条件下, 对一些叶片进行了分析, 结果见图 * 及表 !。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-· ""*· ! 第 " 期王明林, 等: 固相微萃取!气相色谱 " 质谱测定植物叶片中的挥发性物质图 !" (!) 苹果叶片、(") 桃叶片、(#) 山楂叶片、($) 海棠叶片和 (%) 日本樱花叶片挥发性物质的总离子流图&’()!" *+,!- ’+. #/00%., #10+2!,+(0!23 +4 ,1% 5+-!,’-% #+26+/.$3 40+2 -%!5%3 +4(!)!"#$% &$’(#",("))*$+$% &,*%(-", (#).*"/",0$% &(++"/(1(2", ($)!"#$% %&,-/"3(#(% !.$(%))*$+$% 4,25,+%(%#$% &’ ()*+,-,)*. /)0 !"#$#% &’"%()* 1%23%. 20% +,//%0%*- /0)4 )-$%0 1%23%.5 6)0 7%28 ,+%*-,/,(2-,)*.,.%% #291% #5表 #" 不同植物叶片中主要挥发性物质的相对含量*!"-% #" 7+.,%.,3 +4 2!’. 5+-!,’-% #+26+/.$3 40+2 ,1% -%!5%3 +4 $’44%0%., 6-!.,3:;)12-,1% ()47)*%*-+*,#%&#-(,*!"#$#%&’"%()*."*/*’0#%&($$*/(1(2*+*,#%%&’)/*3(,(%!"#$#%4’25’$%(%)(%!$!<%=%*!%!)1, 2(%-2-% (顺!$!己烯!%!醇乙酸酯))(%!$!<%=%*!%!)1,9>-?02-%&’( #)%"#$( %’%&( *#%"’( ++%$#( &+%(顺!$!己烯!%!醇丁酸酯)"( ’+##*( ,&’&( )$’%( $’$-)(%!$!<%=%*!%!)%,#!4%-$?19>-?02-%(顺!$!己烯!%!醇!#!甲基丁酸酯)%( *&$+( &’,%( &*&--)(%!$!<%=%*!%!)1, $%=2*)2-%(顺!$!己烯!%!醇己酸酯)-#( &)+)( $$*--@%-$?1 .21,(?12-% (水杨酸甲酯)A,%-$?1 7$-$212-% (邻苯二甲酸二乙酯)--"( #",-----+( ’#%%#+( ,&*#, #, "!#0,4%-$?1!%, $!7%*-2*%+,)1 +,,.)9>-?02-%(#, #, "!三甲基!%, $!丙二醇异丁酸酯)$, $, ’!#0,4%-$?1!%, "!$%=2+,%*%($, $, ’!三甲基!%, "!己二烯))(%!$, &!A,4%-$?1!%, $, &!)(-2-0,%*%(顺!$, &!二甲基!%, $, &!辛三烯)B17$2!/20*%.%*% (!!法呢烯)#, ,!A,4%-$?1!%, ,!)(-2+,%*% (#, ,!二甲基!%, ,!辛二烯)&!@%-$?1!%!>*+%(%*% (&!甲基!%!十一碳烯)%!#%-02+%(%*% (%!十四碳烯)%!A)+%(2*)1 (%!十二烷醇)----’( #"%)----"( &%#--%#( #$#--’( ’%%%%’( "#%)")( *+%’----%( )&%))( #*,----)( #’*----%( +%#-----,( ,+,· ’"$· 色谱第 !" 卷表 !" (续)!"#$% !" (&’()*(+%,)!"#$%&#’ (")*"+’+%!"#$%&$’(#")*$+$%&,*%(-".*"/",0$%&(++"/(1(2"!"#$%%&,-/"3(#(%)*$+$%4,25,+%(%-(%,#,-’.’+,$,"# (顺,#,己烯,$,醇)!% #!$!&&&&#, ’, $$,/0&)’%12#,!, (, $),3"3’($%0&’+’,$,"#(#, ’, $$,三甲基,!, (, $),十二碳三烯,$,醇)-’*%$+’, !, #, +,%0&)’%12# (!, #, +,三甲基庚烷)45"*0"*2#(2(#"1’.$+’ (异丙基环己烷)#, +,6&)’%12#1’*%$+’ (#, +,二甲基庚烷)",7’%12#,!, (,3&%’0%&$0289%2#*1’+"#(",甲基,!, (,二叔丁基苯酚)&&$% *#$!&&)% ++*&)% ($$$&"% !+")% ((+)% *(’)% ’!*&&&$% +,&$% ’+’&&&&*% *+$)$!% !’*" /1’ +9)8’05 &+ %1’ 59*’05(0&*%5 ": ("+%’+%5 $0’ %1’ *’$; +9)8’05 &+ <&=> #>& ?+3’%’(%$8#’>- - 远距离植物对螨类所起的作用主要是通过螨类的视觉和嗅觉来完成的, 由于叶螨的视觉系统较为退化, 因此嗅觉作用在选择寄主植物的行为过程中显得更为重要, 而植物在代谢过程中产生的挥发性次生代谢物质对植食性螨类的嗅觉定向有直接的影响果、 海棠、 桃、 山楂和樱桃等, 由图 # 及表 ! 可以看出, 这些植物叶片中的挥发性物质在上述色谱条件下能够得到很好的分离, 并且有 # 种以上的植物叶片都含有较多量的顺,#,己烯,$,醇乙酸酯、 顺,#,己烯,$,醇丁酸酯和 !,法呢烯, 其中顺,#,己烯,$,醇乙酸酯在苹果叶片、 桃叶片、 山楂叶片、 海棠叶片和日本樱 花 叶 片 中 分 别 占 ’+% !)@、 !#% $+@、 ’% ,!@、"+% **@ 和 #!% ’*@, 而 !,法呢烯在苹果叶片、 桃叶片和 山 楂 叶 片 中 也 分 别 达 到 +% +$@、$+% "!@ 和")% ,*@。已完成的研究表明, 这些叶片对山楂叶螨均有较强的引诱作用对山楂叶螨有引诱作用的主要物质。- - 由于植物的气味成分是多组分的混合物, 因而对叶螨的作用也是综合的。本研究所分析测试到的物质多是相对含量较多的种类, 尚有少部分含量极微的未知物未能搞清其成分和性质, 这些未知物对[!]。快三走势_花少钱中大奖22270.COM-就山楂叶螨而言, 其主要危害的林木有: 苹[*], 因而初步确定这些物质是叶螨在寄主选择中的作用尚不明确。因此, 上述气味成分对叶螨的作用分析, 仅是根据已知物质及其相对含量和该螨实际发生状况的关系所做的推测,下一步还需明确其他未定性峰的成分、 性质等, 并用单一的和不同组合的气味成分对叶螨进行测试, 以最终确定起引诱作用的物质。参考文献:[$] - 6’+= A9":$+,B$+= -9&:9,C&+ D&’#&9,B$+= 69+E&+=,B9B’&+$+,B$+= C&$"F9> G55’+%&$#5 ": H1&+$ I($0"#"=2> J’&,K&+=:L(&’+(’ M0’55(邓国藩,王慧芙, 忻介六,王敦清,吴伟南,王孝祖> 中国蜱螨概要> 北京:科学出版社) ,$,*,[!] - N&+ D9+3’> /1’ O’#$%&"+51&* J’%P’’+ 4+5’(%5 $+3 M#$+%5>J’&K&+=:L(&’+(’ M0’55(钦俊德> 昆虫与植物的关系> 北京:科学出版社) ,$,*’[#] - Q9 R9K&’,S1$+= C&$".&> G+%")"#"=&($# T+"P#’3=’( 鲁 玉杰,张孝羲> 昆虫知识) ,!))$, #* (") :!(!["] - T$++" -,-$00&5 7 U> D H1’) G("#,!))),!( ($)) :! ##+[+] - !$’5 B - D,O$)"5 G ?,!’01$$0 - D 7,L’&+’+ B,-’0,)’+5 D Q 7> I+$# H1’),$,,(,(*:" "(#[(] - <90%"+ T A, J09+$ D, I#)&0$## D O>H10")$%"=0,$,,+,$*:(!+[’] - J#$&0 6 L,J90=’55 Q B,J0"35;2 I 7> I+$# H1’),$,,’,(,:! !#*[*] - L9+ C9=’+,N&$" Q9E&+> L(&’+%&$ L&#V$’ L&+&($’(孙绪艮,乔鲁芹> 林业科学) ,!))",") (#) :$,#D -&=1 O’5"#9%· ("#·

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